Plásmido Doble Nickase (m) Caprin1: sc-424757-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Caprin1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Caprin1 (m) y el plásmido de doble nickasa Caprin1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Caprin1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Caprin1 Anticuerpo (F-3): sc-518251
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Caprin1 | sc-424757-NIC | 20 µg | $410.00 |
Caprin1 (proteína 1 asociada al ciclo celular) es una proteína conservada de unión a ARN que contribuye a la regulación génica postranscripcional al asociarse con complejos ribonucleoproteicos y gránulos de estrés. En células de ratón, Caprin1 favorece la estabilidad del ARNm y el control de la traducción, lo que la vincula con la señalización proliferativa y las respuestas adaptativas al estrés celular. Se ha implicado en la función neuronal y sináptica, la señalización relacionada con el sistema inmunitario y la regulación de transcritos asociados al ciclo celular, en consonancia con vías que coordinan el crecimiento, la diferenciación y la adaptación al estrés. La actividad desregulada de Caprin1 se ha asociado en la literatura con fenotipos del neurodesarrollo y programas alterados de supervivencia celular, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos del metabolismo del ARN y de la expresión génica sensible al estrés.
Caprin1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Caprin1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Caprin1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Caprin1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Caprin1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.