C20orf54 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405094-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C20orf54O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase C20orf54 (h) e o Plasmídeo Double Nickase C20orf54 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC52A3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C20orf54 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405094-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C20orf54 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405094-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC52A3, também conhecido como C20orf54, codifica um transportador de riboflavina de alta afinidade que medeia a captação celular da vitamina B2, um precursor de FMN e FAD, necessários para reações redox dependentes de flavoproteínas. Ao manter a disponibilidade de cofatores flavínicos, o C20orf54 sustenta o metabolismo oxidativo mitocondrial, a β-oxidação de ácidos graxos e a homeostase redox celular de forma mais ampla. Alterações na atividade de SLC52A3 têm sido associadas a fenótipos de deficiência do transportador de riboflavina e a disfunções do neurodesenvolvimento e neuromusculares ligadas ao comprometimento de vias dependentes de flavinas. Na biologia do câncer, a expressão de SLC52A3 tem sido investigada como um determinante metabólico que influencia o suprimento de cofatores e as respostas ao estresse oxidativo.
C20orf54 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC52A3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC52A3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC52A3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC52A3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.