Plasmide Double Nickase (m) c-Abl: sc-418935-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) c-Abl correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide c-Abl Double Nickase (m) et le plasmide c-Abl Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Abl1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) c-Abl | sc-418935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) c-Abl | sc-418935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Chez la souris, Abl1 code la tyrosine kinase non réceptrice c-Abl, un nœud de signalisation multifonctionnel qui intègre les signaux des facteurs de croissance et des intégrines afin de réguler le remodelage du cytosquelette, l’adhérence et la migration cellulaires, l’endocytose et le contrôle des points de contrôle du cycle cellulaire. L’activité de c-Abl s’articule avec la signalisation des dommages à l’ADN et les voies de réponse au stress, modulant des réseaux dépendants de la phosphorylation qui influencent l’apoptose, la différenciation et les programmes transcriptionnels. La dérégulation de la signalisation Abl1/c-Abl et les altérations du contrôle de l’activité kinase sont largement étudiées dans la transformation oncogénique et les signalisations prolifératives aberrantes, tandis que les perturbations de la dynamique de l’actine dépendante de c-Abl sont pertinentes pour l’invasion et le remodelage tissulaire. Dans les modèles murins, Abl1 est fréquemment utilisé pour disséquer les circuits de signalisation pilotés par les kinases et pour relier les réponses au stress génotoxique à des changements de destinée cellulaire.
c-Abl Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Abl1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Abl1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Abl1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Abl1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.