BCMA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423440
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BCMA O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BCMA, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BCMA Anticorpo (D-6): sc-390147
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BCMA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423440 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tnfrsf17 codifica o antígeno de maturação de células B (BCMA), um membro da superfamília de receptores de TNF expresso predominantemente em plasmócitos e em células B em estágios tardios. O BCMA liga-se a APRIL e BAFF para ativar as vias de sinalização NF-κB canônica e não canônica, MAPK e PI3K/AKT, promovendo a sobrevivência dos plasmócitos, a secreção de imunoglobulinas e a manutenção da imunidade humoral. Em modelos murinos, a sinalização dependente de BCMA molda a diferenciação de células B e as respostas de anticorpos, ligando o Tnfrsf17 à homeostase imunológica e à patologia tecidual associada à inflamação. A desregulação da sinalização de BCMA e a expansão de plasmócitos são amplamente utilizadas como leituras moleculares em estudos de fenótipos semelhantes a autoimunidade e de desregulação da linhagem de células B.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BCMA (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tnfrsf17 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tnfrsf17, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tnfrsf17 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BCMA.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tnfrsf17 para a investigação da sinalização de BCMA, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tnfrsf17 críticos para a função BCMA
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tnfrsf17 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BCMA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo BCMA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tnfrsf17. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BCMA Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR BCMA (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tnfrsf17 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tnfrsf17 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.