BCLAF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428381
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BCLAF1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BCLAF1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BCLAF1 Anticorpo (M33-P5B11): sc-101388
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BCLAF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-428381 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Bclaf1 codifica a BCLAF1, um fator nuclear de ligação a DNA e RNA implicado na regulação da transcrição, no splicing de pré-mRNA e no controle da expressão gênica associado à cromatina. A BCLAF1 tem sido vinculada a respostas a danos no DNA e a programas relacionados à apoptose por meio de interações com a sinalização da família BCL2 e com redes transcricionais responsivas ao estresse. Em células de camundongo, a BCLAF1 contribui para a manutenção da estabilidade genômica e para a regulação de vias de ciclo celular e de sobrevivência que moldam a expressão gênica relevante para o desenvolvimento e para o sistema imune. A atividade desregulada de BCLAF1 tem sido associada a capacidade proliferativa alterada e a fenótipos aberrantes de processamento de RNA relevantes para a biologia do câncer e para contextos de sinalização neuroimune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BCLAF1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Bclaf1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Bclaf1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Bclaf1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BCLAF1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Bclaf1 para a investigação da sinalização de BCLAF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Bclaf1 críticos para a função BCLAF1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Bclaf1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BCLAF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo BCLAF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Bclaf1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BCLAF1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR BCLAF1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Bclaf1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Bclaf1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.