B7RP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406855

Visão geral

ICOSLG codifica o ligante induzível do coestimulador de células T (B7RP-1), uma molécula de checkpoint imunitário da família B7 expressa por células apresentadoras de antigénio e por compartimentos estromais, que se liga ao ICOS em células T ativadas. Esta interação promove sinalização coestimuladora que sustenta a proliferação e a sobrevivência das células T e programas de citocinas, moldando as reações do centro germinativo, a diferenciação de células T auxiliares foliculares e respostas de anticorpos com mudança de classe. A sinalização ICOSLG–ICOS cruza-se com vias dependentes de PI3K-AKT e modula a comunicação entre células imunitárias inatas e adaptativas em tecidos inflamados e em microambientes tumorais. A expressão ou sinalização desregulada de ICOSLG tem sido implicada em inflamação autoimune, doença alérgica, imunobiologia de transplantes e mecanismos de evasão imunitária relevantes para a investigação em cancro e infeções crónicas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO B7RP-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ICOSLG em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ICOSLG, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ICOSLG na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína B7RP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ICOSLG para a investigação da sinalização de B7RP-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ICOSLG críticos para a função B7RP-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ICOSLG para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo B7RP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo B7RP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ICOSLG. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo B7RP-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR B7RP-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ICOSLG para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ICOSLG definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.