Asporin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-426152-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AsporinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Asporin (m) e o Plasmídeo Double Nickase Asporin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Aspn. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Asporin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-426152-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Asporin Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-426152-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Aspn codifica a asporina, um pequeno proteoglicano rico em leucina da matriz extracelular que contribui para a fibrilogênese do colágeno e para a regulação da organização da matriz em tecidos musculoesqueléticos. A asporina murina pode modular a sinalização de fatores de crescimento, incluindo interações que influenciam vias da família TGF-β, afetando assim a condrogênese, a osteogênese e a homeostase fibrocartilaginosa. Alterações na expressão ou na função de ASPN têm sido associadas a uma remodelação desregulada da matriz extracelular e à sinalização inflamatória, o que a torna relevante para estudos de osteoartrite, degeneração de disco intervertebral, patologias de tendões/ligamentos e alterações de matriz associadas à fibrose. Modelos in vitro e in vivo frequentemente utilizam a perturbação de Aspn para investigar como sinais da matriz estromal moldam a adesão celular, a mecanotransdução e programas de diferenciação.
Asporin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Aspn em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Aspn. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Aspn. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Aspn interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.