
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
arfaptin 1 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-405033-ACT | 20 µg | $397.00 |
ARFIP1은 arfaptin 1을 암호화하며, arfaptin 1은 Arf 계열 소형 GTPase 결합 단백질로서 막 지질과 결합하고 엔도사이토시스성 막 수송 및 소포 형성(생합성)에 관여합니다. arfaptin 1은 활성화된 ARF 단백질을 BAR 도메인 매개 막 곡률 감지와 연결함으로써, 화물(cargo) 분류, 재활용, 그리고 골지체/엔도좀 구획의 조직화를 조율하는 데 도움을 줍니다. 이러한 과정은 수용체 턴오버와 세포 내 신호전달의 역학에 영향을 미치며, ARFIP1 의존적 수송을 세포 성장과 스트레스 반응을 조절하는 경로와 연결합니다. 막 수송의 이상 조절은 증식성 질환 및 신경퇴행성 질환의 생물학에서 흔히 관찰되는 특징이므로, ARFIP1은 소포 매개 조절의 기전을 연구하는 데 유용한 핵심 지점(node)입니다.
arfaptin 1 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 ARFIP1 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
arfaptin 1 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 ARFIP1 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 ARFIP1 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 arfaptin 1 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 ARFIP1 위치를 보존하고 내인성 위치에서 arfaptin 1 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 ARFIP1 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 arfaptin 1 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.