Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Aquaporin 2/AQP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400402
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Aquaporin 2/AQP2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Aquaporin 2/AQP2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Aquaporin 2/AQP2 Anticorpo (E13-21): sc-47710
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Aquaporin 2/AQP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400402 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
AQP2 codifica a aquaporina-2, um canal de água regulado pela vasopressina que controla a reabsorção osmótica de água nas células principais do ducto coletor renal. Em resposta à sinalização AVPR2–cAMP–PKA, a AQP2 sofre tráfego dependente de fosforilação até a membrana apical, coordenando-se com a reciclagem endocítica e a dinâmica do citoesqueleto para ajustar a permeabilidade da membrana à água. Essa via integra o controle hormonal do equilíbrio hídrico com a polaridade epitelial e os processos de transporte de membrana. A desregulação da expressão, localização ou abertura/fechamento (gating) da AQP2 está associada a prejuízo na capacidade de concentrar a urina e constitui um nó mecanístico em estudos de homeostase da água e disfunção tubular renal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 2/AQP2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AQP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AQP2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AQP2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aquaporin 2/AQP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AQP2 para a investigação da sinalização de Aquaporin 2/AQP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AQP2 críticos para a função Aquaporin 2/AQP2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AQP2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Aquaporin 2/AQP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Aquaporin 2/AQP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AQP2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Aquaporin 2/AQP2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Aquaporin 2/AQP2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AQP2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AQP2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.