Annexin III Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403572-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Annexin IIIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Annexin III (h) e o Plasmídeo Double Nickase Annexin III (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ANXA3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Annexin III Anticorpo (G-1): sc-390700
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Annexin III Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403572-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Annexin III Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403572-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA3 codifica a Anexina III, uma proteína de ligação a fosfolipídios dependente de Ca²⁺ que se associa a membranas celulares para regular o tráfego vesicular, a organização de membranas e processos ligados ao citoesqueleto. A Anexina III tem sido implicada em redes de sinalização relacionadas a respostas inflamatórias e ao estresse oxidativo, podendo influenciar a proliferação, a migração e a sobrevivência celulares por meio de uma modulação dependente do contexto da sinalização próxima à membrana. Alterações na expressão de ANXA3 foram relatadas em múltiplos contextos de pesquisa em câncer e imunologia, nos quais é estudada como participante da biologia tumoral, de fenótipos associados à quimiorresistência e da função de células mieloides. Essas características tornam ANXA3 um alvo útil para dissecar dinâmicas de membrana e vias de sinalização relevantes para mecanismos de doença em modelos de células humanas.
Annexin III O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ANXA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ANXA3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ANXA3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ANXA3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.