Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419041

Visão geral

A angiopoietina 1 (ANGPT1; Ang-1) é um fator de crescimento vascular secretado que se liga ao receptor tirosina-quinase endotelial TIE2/TEK, promovendo a maturação dos vasos, a sobrevivência do endotélio e a estabilização da barreira vascular. Em tecidos de camundongo, a sinalização de ANGPT1 coordena o recrutamento de pericitos, a remodelação da matriz extracelular e respostas anti-permeabilidade, contrabalançando sinais desestabilizadores durante o brotamento angiogênico. Essa via contribui para a regulação da quiescência vascular e do tráfego de células inflamatórias ao modular a integridade das junções e programas de ativação endotelial. A desregulação da sinalização ANGPT1–TIE2 tem sido implicada na angiogênese patológica e em fenótipos de extravasamento vascular relevantes para a remodelação do microambiente tumoral, modelos de lesão isquêmica e pesquisas em doenças vasculares inflamatórias.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Angpt1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Angpt1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Angpt1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Angpt1 para a investigação da sinalização de Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Angpt1 críticos para a função Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Angpt1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Angpt1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Angpt1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Angpt1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.