ANG I Lentiviral Activation Particles (h): sc-401766-LAC

Das humane Gen **ANG** kodiert Angiogenin, eine sekretierte Ribonuklease (RNase‑A‑Superfamilie), die an Zelloberflächenrezeptoren und Komponenten der extrazellulären Matrix bindet, um die Biologie von Endothelzellen, stromale Interaktionen und eine stressadaptive RNA‑Metabolisierung zu regulieren. ANG unterstützt angiogene Programme, indem es Signale für Migration und Proliferation fördert, und kann in den Zellkern translozieren, um die rRNA‑Transkription und die Ribosomenbiogenese zu beeinflussen. Unter zellulärem Stress führt eine angiogeninvermittelte Spaltung von tRNAs zur Entstehung tRNA‑abgeleiteter Fragmente, die die Translation und die Dynamik von Stressgranula modulieren und ANG damit mit integrierten Stressantworten verknüpfen. Eine fehlregulierte ANG‑Expression und ‑Aktivität wurde mit pathologischer Neovaskularisation, Entzündung und dem Remodeling des Tumormikromilieus in Verbindung gebracht; zudem wurden ANG‑Varianten in Kontexten der Neurodegeneration untersucht, einschließlich der Vulnerabilität von Motoneuronen.

ANG I Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ANG-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ANG I Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ANG-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ANG I-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ANG-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.