AIP5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403772-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AIP5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AIP5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AIP5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para WWP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AIP5 Anticorpo (F-3): sc-390897
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AIP5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403772-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AIP5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403772-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WWP1 codifica a ligase E3 ubiquitina-proteína humana AIP5, uma enzima com domínio HECT que ubiquitina diversos substratos para regular a estabilidade proteica, o tráfego intracelular e a amplitude de sinalização. Por meio do reconhecimento de motivos PPxY via seus domínios WW, a AIP5 ajuda a ajustar vias que controlam crescimento celular, polaridade e respostas ao estresse, incluindo a modulação da sinalização proximal a receptores e a renovação (turnover) de proteínas regulatórias. A atividade desregulada de WWP1/AIP5 tem sido associada a alterações na homeostase da ubiquitina e a programas de sinalização aberrantes implicados na transformação oncogênica e em fenótipos do desenvolvimento. Consequentemente, WWP1 é frequentemente estudado para dissecar como a proteostase mediada por ubiquitina se integra à proliferação, migração e reprogramação de vias em células humanas.
AIP5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus WWP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de WWP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função WWP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com WWP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.