α-actinin-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401186-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α-actinin-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α-actinin-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase α-actinin-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACTN2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α-actinin Anticorpo (H-2): sc-17829
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α-actinin-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401186-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α-actinin-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401186-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACTN2 codifica a α-actinina-2, uma proteína de ligação cruzada à actina insensível ao cálcio, enriquecida nos discos Z e nos costâmeros do músculo estriado, onde ancora os filamentos de actina e organiza a arquitetura do sarcómero. Por meio de interações com titina, integrinas, canais iónicos e adaptadores de sinalização, a α-actinina-2 contribui para a mecanotransdução, a remodelação do citoesqueleto e as vias de transmissão de força que acoplam a atividade contrátil às respostas celulares. Alterações em ACTN2 têm sido associadas a cardiomiopatias hereditárias e à desorganização miofibrilar, tornando-o um nó central para o estudo da estabilidade estrutural e da sinalização ao stress em cardiomiócitos e fibras musculares esqueléticas. As aplicações de investigação incluem, frequentemente, a dissecação de redes de proteínas do disco Z, a dinâmica de montagem do sarcómero e as relações genótipo–fenótipo em modelos humanos de doenças musculares.
α-actinin-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACTN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACTN2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACTN2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACTN2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.