ZRSR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423570

Descripción general

Zrsr1 codifica ZRSR1, un factor asociado al espliceosoma implicado en el reconocimiento y procesamiento de intrones de tipo U12 durante el empalme (splicing) del pre-ARNm. Al influir en la actividad del espliceosoma menor, ZRSR1 puede afectar la maduración de los transcritos, el equilibrio de isoformas y programas posteriores de expresión génica vinculados al control del ciclo celular y la diferenciación. En el ratón, Zrsr1 también destaca en el contexto de la impronta genómica y los efectos según el progenitor de origen, lo que proporciona un marco para estudiar la regulación alélica específica del procesamiento de ARN. La desregulación del splicing de intrones menores se ha relacionado con anomalas del desarrollo y disfunción hematopoyética en múltiples sistemas modelo, lo que hace que Zrsr1 sea relevante para estudios mecanísticos de la biología de enfermedades asociadas al splicing.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZRSR1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zrsr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zrsr1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zrsr1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZRSR1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zrsr1 para la investigación de la señalización de ZRSR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Zrsr1 críticos para la función de ZRSR1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zrsr1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZRSR1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ZRSR1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zrsr1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZRSR1 (m) y el plásmido HDR ZRSR1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zrsr1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zrsr1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.