ZHX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436490

Visão geral

Zhx2 codifica a proteína 2 com dedos de zinco e homeoboxes (ZHX2), um fator de transcrição nuclear que pode atuar como regulador dependente do contexto da expressão gênica por meio da ligação ao DNA e de interações com outros repressores transcricionais. Em tecidos de camundongos, a ZHX2 tem sido implicada em programas de diferenciação e maturação de hepatócitos e no controle de redes de genes metabólicos enriquecidos no fígado, incluindo vias ligadas ao metabolismo de lipídios e ao processamento de xenobióticos. Alterações na atividade de ZHX2 têm sido associadas a programas transcricionais desregulados relevantes para inflamação e biologia tumoral, tornando-a um nó útil para estudar o controle transcricional da homeostase tecidual. Essas propriedades sustentam a investigação de mecanismos de cromatina e transcrição dependentes de ZHX2 em estados celulares relevantes para o desenvolvimento e para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZHX2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zhx2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zhx2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zhx2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZHX2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zhx2 para a investigação da sinalização de ZHX2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zhx2 críticos para a função ZHX2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zhx2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ZHX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ZHX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zhx2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ZHX2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ZHX2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zhx2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zhx2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.