Xanthine Oxidase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401185
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Xanthine Oxidase O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Xanthine Oxidase, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Xanthine Oxidase Anticorpo (A-3): sc-398548
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Xanthine Oxidase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401185 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O XDH humano codifica a xantina oxidase, uma enzima dependente de molibdênio que catalisa as etapas finais do catabolismo das purinas, convertendo hipoxantina em xantina e xantina em ácido úrico. Durante essas reações, pode gerar espécies reativas de oxigênio, ligando o metabolismo de purinas à homeostase redox e à sinalização de estresse oxidativo. A atividade da xantina oxidase influencia a função endotelial, as respostas inflamatórias e a adaptação metabólica, e sua desregulação tem sido associada à biologia relacionada à hiperuricemia, a mecanismos de lesão por isquemia–reperfusão e a vias oxidativas relevantes para doenças cardiometabólicas. O XDH também é estudado no contexto do metabolismo hepático e do balanço sistêmico de nitrogênio, em que alterações no turnover de purinas podem remodelar respostas celulares ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Xanthine Oxidase (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene XDH em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do XDH, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do XDH na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Xanthine Oxidase.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de XDH para a investigação da sinalização de Xanthine Oxidase, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) XDH críticos para a função Xanthine Oxidase
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos XDH para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Xanthine Oxidase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Xanthine Oxidase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus XDH. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Xanthine Oxidase Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Xanthine Oxidase (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia XDH para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo XDH definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.