WNK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403420-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WNK1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase WNK1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase WNK1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para WNK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WNK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403420-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
WNK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403420-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WNK1 (with-no-lysine [K] 1) codifica uma quinase de serina/treonina que atua como regulador a montante do transporte iónico e da homeostase do volume celular, através de cascatas de fosforilação que envolvem SPAK/OSR1 e, a jusante, cotransportadores da família SLC12. Ao integrar sinais de stress osmótico com as saídas de sinalização, o WNK1 influencia o manuseio epitelial de eletrólitos, a dinâmica do citoesqueleto e a comunicação cruzada entre redes de quinases que afeta a proliferação e a migração. A atividade do WNK1 está associada à regulação da pressão arterial e ao manuseio renal de sal, e a desregulação de vias dependentes de WNK1 tem sido estudada em contextos que incluem fenótipos associados à hipertensão e neuropatias. Essas características tornam o WNK1 um nó útil para dissecar a sinalização responsiva à osmolaridade e a regulação de vias de transporte em modelos de células humanas.
WNK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus WNK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de WNK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função WNK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com WNK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.