WDTC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411657

Descripción general

WDTC1 (también conocido como factor regulador de la adipogénesis) codifica una proteína que contiene repeticiones WD y dominios TPR, implicada en el control del almacenamiento de lípidos y de los programas de diferenciación de adipocitos. Las funciones descritas vinculan a WDTC1 con mecanismos reguladores dependientes de ubiquitina y con redes transcripcionales que influyen en el equilibrio energético celular, con efectos posteriores sobre la expresión de genes adipogénicos y la homeostasis metabólica. La actividad alterada de WDTC1 se ha asociado con fenotipos relevantes para la obesidad y una desregulación metabólica más amplia, lo que la hace útil para estudios mecanísticos de la acumulación de grasa y la señalización sensible a nutrientes. En modelos celulares, la perturbación de WDTC1 puede ayudar a investigar vías que gobiernan la biología de las gotas lipídicas, la adipogénesis y las respuestas al estrés metabólico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO WDTC1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen WDTC1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del WDTC1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de WDTC1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína WDTC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en WDTC1 para la investigación de la señalización de WDTC1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de WDTC1 críticos para la función de WDTC1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de WDTC1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido WDTC1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido WDTC1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus WDTC1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR WDTC1 (h) y el plásmido HDR WDTC1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología WDTC1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana WDTC1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.