VDAC3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423663

Descripción general

Vdac3 codifica el canal aniónico dependiente de voltaje 3 (VDAC3), un poro de barril β en la membrana externa mitocondrial que regula el intercambio de metabolitos e iones entre el citosol y las mitocondrias. Como parte de la familia VDAC, VDAC3 contribuye al acoplamiento de la fosforilación oxidativa, al mantenimiento del potencial de membrana mitocondrial y al control de la homeostasis mitocondrial sensible al estado redox. Los procesos asociados a VDAC3 se entrecruzan con la señalización de apoptosis, el manejo de especies reactivas de oxígeno y las vías de control de calidad mitocondrial que moldean las respuestas celulares al estrés. La función alterada de VDAC3 se ha estudiado en contextos de disfunción mitocondrial, incluidos el desequilibrio bioenergético y defectos específicos de tejido vinculados a mecanismos de enfermedad metabólica y neurodegenerativa.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO VDAC3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Vdac3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Vdac3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Vdac3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína VDAC3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Vdac3 para la investigación de la señalización de VDAC3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Vdac3 críticos para la función de VDAC3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Vdac3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido VDAC3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido VDAC3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Vdac3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR VDAC3 (m) y el plásmido HDR VDAC3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Vdac3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Vdac3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.