VDAC2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423662

Descripción general

Vdac2 codifica el canal aniónico dependiente de voltaje 2 (VDAC2), una porina principal de la membrana mitocondrial externa que regula el flujo de metabolitos e iones entre el citosol y las mitocondrias. VDAC2 participa en la respiración mitocondrial, la homeostasis redox y la señalización dependiente de Ca²⁺ al influir en el intercambio de ATP/ADP y en el acoplamiento con procesos de transporte de la membrana interna. También modula la apoptosis intrínseca al controlar la permeabilización de la membrana mitocondrial externa y sus interacciones con proteínas de la familia BCL-2, vinculando el metabolismo mitocondrial con las decisiones sobre el destino celular. La desregulación de las vías asociadas a VDAC2 se ha relacionado con alteraciones en la bioenergética y en las respuestas al estrés relevantes para la neurodegeneración, los mecanismos de enfermedad cardiometabólica y los fenotipos de supervivencia de células cancerosas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO VDAC2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Vdac2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Vdac2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Vdac2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína VDAC2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Vdac2 para la investigación de la señalización de VDAC2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Vdac2 críticos para la función de VDAC2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Vdac2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido VDAC2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido VDAC2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Vdac2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR VDAC2 (m) y el plásmido HDR VDAC2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Vdac2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Vdac2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.