Vasohibin-2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-407838-LAC

VASH2 codifica a vasohibina-2, um regulador secretado e associado à célula da angiogénese que modula a brotação endotelial, a maturação dos vasos e a remodelação do microambiente. Participa em vias que governam a dinâmica da matriz extracelular, a migração celular e a sinalização parácrina entre compartimentos estromais e vasculares, com efeitos a jusante em programas transcricionais adaptativos à hipóxia e pró-angiogénicos. A expressão alterada de VASH2 tem sido associada à vascularização tumoral e a fenótipos invasivos em múltiplos contextos de cancro, e também é estudada na remodelação tecidular associada à inflamação. Estas propriedades fazem de VASH2 um nó útil para investigar a sinalização angiogénica, a comunicação cruzada entre endotélio e tumor e mecanismos de doença impulsionados pelo microambiente.

As Partículas de Ativação Lentivirais Vasohibin-2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de VASH2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Vasohibin-2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição VASH2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Vasohibin-2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo VASH2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.