Plásmido Doble Nickase (h) USP28: sc-407678-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)USP28 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa USP28 (h) y el plásmido de doble nickasa USP28 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a USP28. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) USP28 | sc-407678-NIC | 20 µg | $410.00 |
USP28 codifica una proteasa específica de ubiquitina que contrarresta a las ligasas de ubiquitina al eliminar cadenas de poliubiquitina de proteínas sustrato, regulando así su estabilidad y la salida de señalización. En células humanas, USP28 se ha vinculado con el control del recambio proteico en vías que gobiernan las respuestas al daño del ADN, procesos asociados a la cromatina y la progresión del ciclo celular, incluida la modulación de programas dependientes de MYC mediante la desubiquitinación de factores reguladores clave. Al moldear la señalización por ubiquitina, USP28 puede influir en la tolerancia al estrés replicativo y en la señalización de los puntos de control, lo que la hace relevante para estudios de integridad genómica y transformación oncogénica. Se han observado alteraciones en la actividad o la expresión de USP28 en múltiples contextos tumorales, lo que respalda su utilidad como diana para investigaciones mecanísticas en biología del cáncer.
USP28 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus USP28 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de USP28. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de USP28. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con USP28 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.