Plásmido Doble Nickase (h) USP27X: sc-407628-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)USP27X consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa USP27X (h) y el plásmido de doble nickasa USP27X (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a USP27X. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) USP27X | sc-407628-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) USP27X | sc-407628-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP27X codifica una proteasa específica de ubiquitina que elimina cadenas de ubiquitina de proteínas diana para regular su estabilidad, su localización subcelular y su salida de señalización. Como parte de la maquinaria de desubiquitinación, USP27X contribuye al control de la proteostasis y a la modulación de vías dependientes de ubiquitina que influyen en la progresión del ciclo celular, las respuestas al estrés y los programas transcripcionales. La desregulación de la señalización por ubiquitina y de la actividad de las desubiquitinasas está ampliamente implicada en defectos del mantenimiento del genoma y en una señalización de crecimiento aberrante, lo que convierte a USP27X en un nodo relevante para estudios mecanísticos de la regulación impulsada por ubiquitina. Por ello, la USP27X humana es de interés en investigaciones sobre el reconfigurado de vías y las alteraciones del recambio proteico asociadas a enfermedades.
USP27X El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus USP27X en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de USP27X. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de USP27X. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con USP27X alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.