Plasmide CRISPR/Cas9 KO UQCRC1 (m): sc-423625

Présentation

Uqcrc1 code pour la protéine centrale 1 de la ubiquinol-cytochrome c réductase (UQCRC1), un composant structural essentiel du complexe III (cytochrome bc1) de la chaîne respiratoire mitochondriale, qui favorise le transfert d’électrons de l’ubiquinol vers le cytochrome c et contribue au maintien de la phosphorylation oxydative. En influençant le potentiel de membrane mitochondrial, la production d’ATP et l’homéostasie des espèces réactives de l’oxygène, UQCRC1 participe au métabolisme énergétique cellulaire et aux programmes de signalisation rédox. Une altération de la fonction du complexe III peut perturber l’adaptation métabolique et les réponses au stress, des processus fréquemment étudiés dans des modèles de neurodégénérescence, de phénotypes cardiométaboliques et de biologie des maladies prolifératives. En tant que sous-unité centrale du complexe III, UQCRC1 est couramment étudiée dans des voies reliant la dysfonction mitochondriale à une sensibilité modifiée à l’apoptose, à la signalisation hypoxique et à la bioénergétique cellulaire intégrée.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO UQCRC1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Uqcrc1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Uqcrc1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Uqcrc1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine UQCRC1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Uqcrc1 pour l'étude de la signalisation de UQCRC1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Uqcrc1 essentiels à la fonction de UQCRC1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Uqcrc1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le UQCRC1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le UQCRC1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Uqcrc1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le UQCRC1 plasmide HDR (m) et le UQCRC1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Uqcrc1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Uqcrc1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.