Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UBE2J1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405892
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UBE2J1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico UBE2J1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UBE2J1 Anticorpo (B-6): sc-377002
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UBE2J1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405892 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
UBE2J1 codifica uma enzima E2 conjugadora de ubiquitina ancorada ao retículo endoplasmático (RE), que coopera com ligases E3 para ubiquitinar substratos mal dobrados ou regulados, direcionando-os para degradação pelo proteassoma. Atua na degradação associada ao RE (ERAD), conectando o controle de qualidade proteica à atividade do sistema ubiquitina–proteassoma e à manutenção da homeostase do RE durante o estresse celular. Por meio da modulação da proteostase, UBE2J1 influencia vias relacionadas à sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (UPR), à maturação de proteínas secretórias e ao turnover de proteínas associadas à membrana. A desregulação de componentes do ERAD, incluindo UBE2J1, é relevante para pesquisas sobre distúrbios caracterizados por estresse proteotóxico e por alterações no turnover proteico mediado por ubiquitina.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UBE2J1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene UBE2J1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do UBE2J1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do UBE2J1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UBE2J1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de UBE2J1 para a investigação da sinalização de UBE2J1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) UBE2J1 críticos para a função UBE2J1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos UBE2J1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo UBE2J1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo UBE2J1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus UBE2J1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo UBE2J1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR UBE2J1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia UBE2J1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo UBE2J1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.