TUSC2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407062

Descripción general

TUSC2 (candidato 2 a supresor tumoral), también conocido como FUS1, codifica una proteína pequeña asociada a la mitocondria implicada en la regulación de la homeostasis celular, incluido el control de las especies reactivas de oxígeno, la señalización de calcio y la apoptosis inducida por estrés. TUSC2 se ha relacionado con la modulación de vías impulsadas por quinasas como la señalización PI3K/AKT y MAPK, influyendo en los programas de proliferación y supervivencia en células epiteliales. La disminución de la expresión o la pérdida funcional de TUSC2 se observa con frecuencia en múltiples tipos de tumores y se asocia con una función mitocondrial alterada y un control del crecimiento desregulado. Estas propiedades hacen de TUSC2 una diana útil para estudiar la señalización de la mitocondria al núcleo, las respuestas al estrés oxidativo y las dependencias de vías relevantes para la biología del cáncer.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TUSC2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TUSC2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TUSC2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TUSC2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TUSC2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TUSC2 para la investigación de la señalización de TUSC2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TUSC2 críticos para la función de TUSC2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TUSC2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TUSC2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TUSC2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TUSC2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TUSC2 (h) y el plásmido HDR TUSC2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TUSC2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TUSC2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.