TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407927

Descripción general

TTF1 (factor de terminación de la transcripción 1; también conocido como TTFC) es una proteína nucleolar de unión al ADN que regula la terminación de la transcripción por la ARN polimerasa I y contribuye a la organización de la cromatina del ADN ribosómico (rDNA) y a la arquitectura del nucléolo. Al unirse a elementos terminadores específicos dentro de las repeticiones de ADN ribosómico, TTF1 ayuda a coordinar la síntesis de rRNA con los eventos de replicación y reparación en el locus de rDNA, influyendo en la biogénesis ribosomal y la proteostasis. El control alterado de la transcripción por la Pol I y de la función nucleolar es una característica distintiva del estrés proliferativo y se estudia con frecuencia en el contexto de la señalización oncogénica, la inestabilidad genómica y la senescencia celular. Como resultado, TTF1 se analiza habitualmente en vías que conectan la homeostasis nucleolar, la regulación transcripcional y las respuestas de los puntos de control del ciclo celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TTF1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TTF1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TTF1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TTF/Transcription Termination Factor/TTF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TTF1 para la investigación de la señalización de TTF/Transcription Termination Factor/TTF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TTF1 críticos para la función de TTF/Transcription Termination Factor/TTF1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TTF1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TTF1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 (h) y el plásmido HDR TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TTF1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TTF1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.