TSSK 2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423532

Descripción general

El gen murino **Tssk2** codifica la quinasa 2 específica del testículo de serina/treonina (TSSK2), una quinasa enriquecida en células germinales implicada en la diferenciación posmeiótica de las espermátidas y en los eventos de remodelación molecular necesarios para la maduración del espermatozoide. Las quinasas de la familia TSSK se asocian con el control dependiente de la fosforilación de los programas de espermiogénesis, incluida la reorganización de la cromatina, la dinámica del citoesqueleto y el ensamblaje de estructuras flagelares. La alteración de la señalización de TSSK se ha vinculado con defectos de fertilidad masculina y con una función espermática anómala en modelos experimentales, lo que convierte a TSSK2 en un punto de interés útil para estudiar la biología reproductiva. Como quinasa restringida al testículo, TSSK2 también sirve como modelo para desentrañar redes de quinasas específicas de tejido y la proteostasis durante el desarrollo tardío de las células germinales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TSSK 2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tssk2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tssk2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tssk2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TSSK 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tssk2 para la investigación de la señalización de TSSK 2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tssk2 críticos para la función de TSSK 2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tssk2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TSSK 2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TSSK 2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tssk2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TSSK 2 (m) y el plásmido HDR TSSK 2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tssk2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tssk2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.