TMEM132B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-414044

Übersicht

TMEM132B kodiert ein Single-Pass-Transmembranprotein der TMEM132-Familie, das im Nervensystem angereichert ist und mit der Organisation der Zellmembran sowie Zell–Zell- und Zell–EZM-Interaktionen (extrazelluläre Matrix) in Verbindung steht. Neuere Studien bringen TMEM132-Proteine mit der Kopplung an das Zytoskelett und adhäsionsbezogenen Prozessen in Zusammenhang, die das Neuritenauswachsen, die synaptische Konnektivität und die Zellmorphologie beeinflussen. Die Expression von TMEM132B und genetische Varianten wurden in neuroentwicklungsbiologischen und neuropsychiatrischen Kontexten untersucht, was seine Relevanz für die Erforschung von Signalwegen unterstreicht, die die Bildung und Aufrechterhaltung neuronaler Netzwerke prägen. Eine funktionelle Untersuchung von TMEM132B kann dazu beitragen, zu klären, wie transmembrane Gerüststrukturen mit Signalmolekülen zusammenwirken, die die neuronale Differenzierung und stressinduzierte Umbaureaktionen steuern.

Das TMEM132B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TMEM132B-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TMEM132B-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TMEM132B nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TMEM132B-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TMEM132B-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TMEM132B-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TMEM132B-Exone abzielen, die für die TMEM132B-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TMEM132B-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TMEM132B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TMEM132B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TMEM132B-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TMEM132B HDR-Plasmid (h) und TMEM132B HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TMEM132B-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TMEM132B-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.