TLK2 Plasmide Double Nickase (h): sc-405426-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TLK2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TLK2 Double Nickase Plasmid (h) e il TLK2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TLK2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TLK2 Antibody (E-12): sc-393506
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TLK2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405426-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TLK2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405426-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La Tousled-like kinase 2 (TLK2) è una chinasi serina/treonina che svolge un ruolo nella regolazione della cromatina e nel mantenimento del genoma durante la replicazione del DNA e la progressione del ciclo cellulare. TLK2 fosforila substrati coinvolti nell’assemblaggio dei nucleosomi e nell’attività dei chaperoni degli istoni, collegando il rimodellamento della cromatina accoppiato alla replicazione alla segnalazione del danno al DNA e ai processi di recupero. Attraverso queste funzioni, TLK2 influenza le risposte allo stress replicativo, il controllo dei checkpoint e il mantenimento dell’integrità epigenetica. Alterazioni dell’attività o del dosaggio di TLK2 sono state associate a fenotipi di neurosviluppo e sono state studiate in contesti in cui dinamiche della cromatina compromesse e instabilità genomica contribuiscono ai meccanismi di malattia.
TLK2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TLK2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TLK2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TLK2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TLK2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.