TIF1γ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403230
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TIF1γ El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TIF1γ, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TIF1γ Anticuerpo (XX-19): sc-101179
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TIF1γ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403230 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TRIM33 codifica TIF1γ, un regulador transcripcional y ligasa E3 de ubiquitina de la familia de motivos tripartitos (TRIM) que integra el control génico dependiente de la cromatina con la transducción de señales. TIF1γ modula la señalización TGF-β/SMAD al regular la disponibilidad de SMAD4 e influye en programas transcripcionales específicos de linaje mediante interacciones con correpresores y la maquinaria epigenética. También contribuye a la estabilidad del genoma y a las respuestas al daño del ADN, vinculando el control transcripcional con vías celulares de estrés. La actividad desregulada de TRIM33 se ha asociado con una diferenciación alterada y con contextos de señalización oncogénica, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos en biología del cáncer y regulación del desarrollo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TIF1γ (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRIM33 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRIM33 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRIM33 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TIF1γ.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRIM33 para la investigación de la señalización de TIF1γ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TRIM33 críticos para la función de TIF1γ
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRIM33 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TIF1γ CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TIF1γ CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRIM33. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TIF1γ (h) y el plásmido HDR TIF1γ (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRIM33 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRIM33 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.