Plásmido Doble Nickase (m) TGF beta Receptor 2/TGFBR2: sc-423371-NIC

El gen murino **Tgfbr2** codifica el receptor 2 de TGF beta (**TGFBR2**), una quinasa transmembrana de serina/treonina que se une a ligandos TGFB y fosforila a TGFBR1 para iniciar la señalización canónica de **SMAD2/3**. Esta vía coordina un control dependiente del contexto de la regulación del ciclo celular, la diferenciación, la transición epitelio-mesenquimal y la remodelación de la matriz extracelular, a la vez que se integra con las vías de señalización **MAPK**, **PI3K–AKT** y **GTPasas RHO**. En investigación biomédica, la actividad alterada de TGFBR2 se utiliza ampliamente para modelar la desregulación de la homeostasis tisular, la modulación inmunitaria y la remodelación fibrótica, así como la reorganización de la vía observada en biología del cáncer y en fenotipos del desarrollo. Dado que TGFBR2 se sitúa en la cúspide de la transducción de señales de TGFB, alterar **Tgfbr2** proporciona una forma directa de analizar los programas transcripcionales aguas abajo y los circuitos de retroalimentación dependientes del ligando.

TGF beta Receptor 2/TGFBR2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tgfbr2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tgfbr2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tgfbr2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tgfbr2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.