Plasmide Double Nickase (h) TCL-1A: sc-402028-NIC

TCL1A code pour la protéine adaptatrice oncogénique TCL‑1A, un modulateur clé de la signalisation AKT/PKB qui augmente l’activité de la voie PI3K–AKT et soutient les programmes de croissance cellulaire, de survie et de métabolisme. TCL‑1A est surtout exprimée dans les lignages lymphoïdes au cours du développement et peut influencer la maturation des lymphocytes B et T en ajustant les seuils de transduction du signal. Une expression dérégulée de TCL1A a été associée à des phénotypes lymphoprolifératifs et est fréquemment étudiée dans le contexte des hémopathies malignes, où l’activation aberrante d’AKT et une régulation altérée de l’apoptose sont courantes. En tant que cofacteur de signalisation, TCL‑1A offre un point d’entrée mécanistique pour analyser comment l’amplification d’une voie influence les états transcriptionnels, les réponses au stress et les comportements cellulaires associés à la transformation.

TCL-1A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TCL1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TCL1A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TCL1A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TCL1A.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.