TCF-19 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404549
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TCF-19 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TCF-19, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TCF-19 Anticuerpo (H-2): sc-390923
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TCF-19 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404549 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TCF19 (factor de transcripción 19) codifica TCF-19, una proteína nuclear de unión al ADN enriquecida en células proliferativas y vinculada a programas de control transcripcional que coordinan la progresión del ciclo celular. Se ha asociado con la regulación de genes implicados en la replicación del ADN y la entrada en fase S, apoyando vías que acoplan la dinámica de la cromatina con señales de crecimiento. Se han descrito alteraciones en la expresión de TCF19 en múltiples contextos tumorales y, además, estudios genéticos y funcionales la implican en fenotipos inmunitarios y metabólicos, incluida la susceptibilidad a enfermedades autoinmunes. Estas conexiones hacen de TCF-19 una diana útil para desentrañar redes transcripcionales que influyen en la proliferación, el mantenimiento del genoma y la señalización inflamatoria.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TCF-19 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TCF19 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TCF19 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TCF19 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TCF-19.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TCF19 para la investigación de la señalización de TCF-19, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TCF19 críticos para la función de TCF-19
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TCF19 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TCF-19 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TCF-19 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TCF19. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TCF-19 (h) y el plásmido HDR TCF-19 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TCF19 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TCF19 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.