Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TC-PTP Double Nickase Plasmid (m): sc-422509-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das TC-PTP Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- TC-PTP Double-Nickase-Plasmid (m) und TC-PTP Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Ptpn2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: TC-PTP: sc-398997
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
TC-PTP Double Nickase Plasmid (m) | sc-422509-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen **Ptpn2** kodiert die T‑Zell‑Protein‑Tyrosinphosphatase (TC‑PTP), eine Nicht‑Rezeptor‑Phosphatase, die die Signalübertragung von Zytokin‑ und Wachstumsfaktorrezeptoren abschwächt, indem sie zentrale Substrate wie JAKs und STATs dephosphoryliert. Durch die Regulation von JAK/STAT‑ und verwandten immunologischen Signalnetzwerken trägt TC‑PTP dazu bei, Schwellenwerte für Entzündungsreaktionen, T‑Zell‑Aktivierung und die Homöostase des Epithels festzulegen. Die Aktivität von Ptpn2 greift zudem in die Insulinrezeptor‑Signalgebung sowie in Stressantwort‑Signalwege ein, die den Zellstoffwechsel und die Proliferation beeinflussen. Genetische und funktionelle Studien bringen eine veränderte PTPN2/TC‑PTP‑Signalgebung mit autoimmunen und entzündlichen Phänotypen, immunsuppressiven Kontexten mit Relevanz für Krebs sowie metabolischer Dysregulation in Verbindung und machen Ptpn2 damit zu einem wertvollen Ziel für mechanistische Untersuchungen.
TC-PTP Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Ptpn2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Ptpn2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Ptpn2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Ptpn2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.