Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) TC-PTP: sc-403071-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TC-PTP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TC-PTP Double Nickase (h) et le plasmide TC-PTP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PTPN2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TC-PTP Antibody (F-8): sc-373835
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TC-PTP | sc-403071-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TC-PTP | sc-403071-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTPN2 code la phosphatase à tyrosine des protéines non réceptrice TC-PTP, un régulateur négatif majeur de la signalisation des cytokines et des facteurs de croissance. TC-PTP déphosphoryle des substrats des voies JAK/STAT et module des nœuds de signalisation associés aux récepteurs qui façonnent l’activation des cellules immunitaires, l’homéostasie épithéliale et les réponses au stress cellulaire. Par ces activités, PTPN2 influence la signalisation inflammatoire, les interactions (cross-talk) entre la signalisation de l’insuline et les voies métaboliques, ainsi que des points de contrôle régissant la prolifération et la survie. Des études génétiques et fonctionnelles ont relié une activité altérée de PTPN2 à une dérégulation immunitaire et à des phénotypes associés à l’inflammation, étayant sa pertinence dans des modèles d’auto-immunité et de biologie du cancer.
TC-PTP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PTPN2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PTPN2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PTPN2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PTPN2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.