TBX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423282
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TBX5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TBX5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TBX5 Anticorpo (A-4): sc-376952
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TBX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423282 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tbx5 codifica o fator de transcrição do tipo T-box TBX5, um regulador que se liga ao DNA de forma específica de sequência e coordena programas gênicos do desenvolvimento que controlam a padronização do membro anterior e a morfogênese cardíaca em camundongos. O TBX5 integra-se a redes transcricionais centrais envolvendo NKX2-5, GATA4 e fatores da família MEF2 para modular a atividade de enhancers e a especificação de linhagens em tecidos derivados do mesoderma. Sua atividade influencia vias que regulam a formação das câmaras cardíacas, o desenvolvimento do sistema de condução e a diferenciação de cardiomiócitos, e alterações na dosagem de Tbx5 estão associadas a fenótipos de malformações congênitas do coração e dos membros. Como regulador do desenvolvimento com alvos dependentes do contexto, o TBX5 é amplamente utilizado para estudar o controle transcricional da organogênese e as decisões de destino celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TBX5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tbx5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tbx5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tbx5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TBX5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tbx5 para a investigação da sinalização de TBX5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tbx5 críticos para a função TBX5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tbx5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TBX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TBX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tbx5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TBX5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TBX5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tbx5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tbx5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.