Plásmido Doble Nickase (h) TBX4: sc-405242-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TBX4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TBX4 (h) y el plásmido de doble nickasa TBX4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TBX4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TBX4 Anticuerpo (G-4): sc-515196
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TBX4 | sc-405242-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TBX4 | sc-405242-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBX4 codifica un factor de transcripción de la familia T-box que se une al ADN mediante un dominio T-box conservado para regular programas de expresión génica que controlan la diferenciación mesenquimal embrionaria, el patrón de las extremidades y la organogénesis. En el desarrollo humano, la actividad de TBX4 se integra con las redes de señalización WNT, BMP y FGF para coordinar la especificación de progenitores y la morfogénesis tisular. La desregulación de la función de TBX4 se ha implicado en fenotipos congénitos del desarrollo, incluidas malformaciones de las extremidades y enfermedad vascular pulmonar, lo que la convierte en una diana relevante para estudiar el control transcripcional de las vías del desarrollo. Como regulador nuclear, TBX4 constituye un nodo abordable para investigar la lógica potenciador–promotor, las decisiones de linaje y los circuitos transcripcionales aguas abajo en modelos celulares pertinentes.
TBX4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TBX4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TBX4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TBX4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TBX4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.