TBL2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407010

Descripción general

TBL2 (transducin beta-like 2) es una proteína asociada al retículo endoplásmico implicada en la señalización cercana a la membrana y en la proteostasis, con funciones descritas en la regulación de las respuestas celulares al estrés y del control de la traducción. Al vincular la homeostasis del RE con redes de señalización, TBL2 se estudia en contextos en los que el manejo de proteínas mal plegadas, la biología de lípidos y membranas y las vías adaptativas de estrés influyen en las decisiones sobre el destino celular. La regulación alterada del estrés del RE y de la señalización metabólica relacionada se ha asociado con fenotipos inflamatorios y metabólicos, lo que convierte a TBL2 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de estos procesos. En modelos celulares humanos, la perturbación de TBL2 permite investigar cómo los nodos de señalización ligados al RE modulan la salida de las vías bajo estrés nutricional, oxidativo o proteotóxico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TBL2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TBL2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TBL2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TBL2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TBL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TBL2 para la investigación de la señalización de TBL2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TBL2 críticos para la función de TBL2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TBL2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TBL2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TBL2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TBL2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TBL2 (h) y el plásmido HDR TBL2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TBL2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TBL2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.