Plásmido Doble Nickase (m) T2R38: sc-436483-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)T2R38 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa T2R38 (m) y el plásmido de doble nickasa T2R38 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Tas2r138. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) T2R38 | sc-436483-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) T2R38 | sc-436483-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Tas2r138 de ratón codifica el receptor del gusto amargo T2R38, un GPCR que detecta ligandos amargos relacionados con la tiourea y se acopla a la señalización mediada por proteínas G para modular la dinámica intracelular de Ca²⁺ y las vías de segundos mensajeros aguas abajo. Más allá de la percepción gustativa, los receptores de la familia T2R se expresan en tejidos extraorales, donde pueden influir en respuestas quimiosensoriales y en programas de señalización celular vinculados a la función epitelial e inmunitaria. La variación de Tas2r138 y la señalización alterada del receptor se estudian a menudo en el contexto de la biología sensorial y la quimiorrecepción, con relevancia más amplia para los mecanismos mediante los cuales la señalización de GPCR configura respuestas a nivel tisular. Como un locus que codifica un receptor y es fácil de manipular, Tas2r138 facilita estudios centrados en vías sobre activación de GPCR, transducción de señales y adaptaciones transcripcionales dependientes del receptor.
T2R38 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tas2r138 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tas2r138. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tas2r138. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tas2r138 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.