非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
T 型 Ca++ CP α1H 抗体 (G-10): sc-377510. 人胎盘 (A) 和细胞外基质 (B) 组织提取物中 T 型 Ca++ CP α1H 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
T-type Ca++ CP α1H CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401147
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- T-type Ca++ CP α1H CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在T-type Ca++ CP α1H基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：T-type Ca++ CP α1H: sc-377510，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
T-type Ca++ CP α1H CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-401147 | 20 µg | $397.00 |
概述
CACNA1H 编码 CaV3.2 T 型钙通道的 α1H 成孔亚基，该通道介导低电压激活的 Ca2+ 内流，从而塑造细胞膜兴奋性、起搏活动以及钙依赖性的基因调控。通过调节阈下振荡与细胞内 Ca2+ 瞬变，CaV3.2 参与多种信号过程，影响神经递质释放、激素分泌以及活动依赖性的转录程序。CACNA1H 功能异常与多类兴奋性相关疾病有关，包括癫痫易感性、神经病理性疼痛机制和心律表型，并且在癌细胞增殖与生存等研究背景中也受到关注。作为兴奋性信号网络中的关键离子通道节点，CACNA1H 常被用于解析依赖钙进入的通路以及通道组（channelome）的重塑。
T-type Ca++ CP α1H CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CACNA1H基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CACNA1H基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CACNA1H开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使T-type Ca++ CP α1H蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CACNA1H缺失的细胞模型，用于T-type Ca++ CP α1H信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 T-type Ca++ CP α1H 功能至关重要的 CACNA1H 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CACNA1H 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 T-type Ca++ CP α1H CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 T-type Ca++ CP α1H CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CACNA1H 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 T-type Ca++ CP α1H HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 T-type Ca++ CP α1H HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CACNA1H同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CACNA1H靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。