Tβ-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407294

概要

TMSB10はチモシンβ-10（Tβ-10）をコードしており、Tβ-10はGアクチンを隔離する小型タンパク質としてGアクチンの利用可能量を調節し、それによってアクチンフィラメントの動態、細胞形態、運動性に影響を与えます。細胞骨格のリモデリングを調整することで、Tβ-10は細胞周期の進行、接着、ストレス応答などの過程に関与し、移動や生存に関連するシグナル伝達ネットワークにも下流で影響を及ぼします。TMSB10の発現変動は、がんや炎症状態など複数の疾患文脈で報告されており、アクチン構造の変化が浸潤、血管新生関連の表現型、組織リモデリングに寄与し得ます。このためTMSB10は、細胞骨格制御と転写プログラム、ならびに細胞状態の遷移を結び付ける経路において、しばしば研究対象となっています。

Tβ-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMSB10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMSB10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMSB10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Tβ-10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Tβ-10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMSB10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Tβ-10の機能に不可欠なTMSB10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMSB10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Tβ-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTβ-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMSB10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Tβ-10 HDRプラスミド（h）および Tβ-10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMSB10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMSB10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。