Partículas Lentivirales de Activación (h) Superoxide Dismutase 2/SOD2: sc-400230-LAC

SOD2 codifica la superóxido dismutasa mitocondrial dependiente de manganeso, que convierte el anión superóxido en peróxido de hidrógeno, constituyendo un eje central de defensa antioxidante en la matriz mitocondrial. Al limitar las especies reactivas de oxígeno (ROS) mitocondriales, SOD2 influye en la homeostasis redox, la respiración mitocondrial y vías de señalización posteriores vinculadas a las respuestas al estrés oxidativo, incluidos los programas regulados por NRF2 y redes transcripcionales asociadas a la inflamación. La alteración de la actividad de SOD2 se ha implicado en mecanismos subyacentes a la neurodegeneración, la disfunción cardiometabólica y la biología del cáncer, donde el daño oxidativo y la disfunción mitocondrial moldean las decisiones sobre el destino celular. Como regulador clave de las ROS mitocondriales, SOD2 se estudia ampliamente por su impacto en la susceptibilidad a la apoptosis, la senescencia y la reprogramación metabólica en células estresadas o transformadas.

Las partículas de activación lentiviral Superoxide Dismutase 2/SOD2 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SOD2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Superoxide Dismutase 2/SOD2 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SOD2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Superoxide Dismutase 2/SOD2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SOD2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.