Partículas Lentivirales de Activación (h) SULT1A3/1A4: sc-417824-LAC

SULT1A3 codifica una sulfotransferasa citosólica que cataliza la conjugación con sulfato de catecolaminas y monoaminas relacionadas, contribuyendo al metabolismo de xenobióticos de fase II y a la homeostasis de los neurotransmisores. La actividad de las proteínas SULT1A3/1A4 regula la biotransformación y la eliminación de metabolitos de la dopamina, la norepinefrina y la serotonina, influyendo en el equilibrio redox celular y en el flujo de metabolitos a través de las vías de sulfatación. Esta familia enzimática se expresa en altos niveles en tejidos selectos y puede modular la señalización local al controlar la disponibilidad de aminas bioactivas. Las alteraciones en la expresión o la actividad de las sulfotransferasas se han investigado en el contexto de rasgos neuropsiquiátricos, la variabilidad en la respuesta farmacológica y la reprogramación metabólica asociada al cáncer, donde la capacidad de sulfatación puede modificar la química del microambiente tumoral.

Las partículas de activación lentiviral SULT1A3/1A4 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SULT1A3 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral SULT1A3/1A4 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SULT1A3, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de SULT1A3/1A4. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SULT1A3 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.