Stat5a CRISPR/Cas9 KOプラスミド (r): sc-437303

概要

STAT5A（signal transducer and activator of transcription 5A）は、プロラクチン、成長ホルモン、インターロイキンなどのサイトカインや増殖因子に応答してJAKキナーゼの下流で活性化される、細胞質に潜在的に存在する転写因子です。リン酸化を受けるとStat5aは二量体を形成し、核へ移行して、多様な組織における増殖、分化、生存、代謝恒常性を制御する遺伝子プログラムを調節します。ラットモデルでは、Stat5aシグナルは造血系統の制御や内分泌応答性の転写ネットワークに関与しており、免疫調節異常、炎症に関連する表現型、ホルモン依存的リモデリングの研究において重要です。STAT5A活性の撹乱は、JAK/STAT経路の回路構造や、MAPKおよびPI3Kシグナルとの転写クロストークを解析するためにしばしば用いられます。

Stat5a CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）は、rat細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Stat5aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Stat5aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Stat5aの機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Stat5a CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）およびStat5a CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Stat5a HDRプラスミド（r）および Stat5a HDRプラスミド（r2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。