SSRP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401780

Descripción general

SSRP1 (proteína 1 de reconocimiento específico de estructura) es una subunidad esencial del complejo FACT de remodelación de la cromatina, que facilita el desensamblaje y reensamblaje de nucleosomas durante la transcripción, la replicación del ADN y la reparación del ADN. Al coordinar la actividad de chaperona de histonas con la progresión de la ARN polimerasa II y la dinámica de la horquilla de replicación, SSRP1 ayuda a mantener la estabilidad del genoma y regula la accesibilidad de la cromatina. Los procesos dependientes de SSRP1 se interconectan con el control del ciclo celular, las respuestas al daño en el ADN y la regulación epigenética, lo que la hace relevante para estudios de estrés replicativo y programas transcripcionales aberrantes. La actividad desregulada de FACT/SSRP1 se ha implicado en estados oncogénicos de la cromatina y en una capacidad proliferativa alterada, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en la biología del cáncer y en la investigación sobre mantenimiento del genoma.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SSRP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SSRP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SSRP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SSRP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SSRP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SSRP1 para la investigación de la señalización de SSRP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SSRP1 críticos para la función de SSRP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SSRP1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SSRP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SSRP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SSRP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SSRP1 (h) y el plásmido HDR SSRP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SSRP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SSRP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.