Sox-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403896

Visão geral

SOX3 codifica a Sox-3, um fator de transcrição com domínio HMG-box que se liga ao DNA e molda programas de expressão gênica dependentes da cromatina, essenciais para a especificação precoce do neuroectoderma e para a manutenção da identidade de progenitores neurais. A Sox-3 atua em redes regulatórias centrais do desenvolvimento juntamente com outros fatores da família SOX, influenciando vias que controlam decisões de destino celular, proliferação e diferenciação no desenvolvimento do sistema nervoso central e do eixo hipófise–hipotálamo. Alterações na dosagem de SOX3 ou perturbações regulatórias têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e a distúrbios do desenvolvimento hipotalâmico-hipofisário, destacando sua relevância para estudos do controle transcricional durante o desenvolvimento humano. Em contextos de pesquisa, SOX3 é frequentemente investigado por seu papel no comprometimento de linhagem, em modelos de diferenciação neural e na arquitetura de redes de fatores de transcrição.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sox-3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SOX3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SOX3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SOX3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sox-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SOX3 para a investigação da sinalização de Sox-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SOX3 críticos para a função Sox-3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SOX3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Sox-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Sox-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SOX3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Sox-3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Sox-3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SOX3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SOX3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.