SOCS-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402585

概要

SOCS5は、サイトカインシグナル伝達抑制因子5（SOCS-5）をコードします。SOCS-5はSOCSファミリーの一員で、SH2ドメインによる標的認識と、SOCSボックス依存的なユビキチンリガーゼ複合体のリクルートを介して、サイトカインおよび増殖因子受容体シグナルを減弱させます。SOCS-5はJAK/STATシグナルの負の制御に関与し、免疫細胞の活性化、炎症応答、分化プログラムに関連する受容体関連経路を調節し得ます。シグナルの強度と持続時間を制御することで、SOCS-5はサイトカイン駆動性の転写出力のフィードバック制御や、MAPK関連プロセスとのクロストークにも寄与します。SOCS5の発現や機能の破綻は、異常な免疫シグナル伝達と関連づけられており、がんに伴うシグナル再配線や炎症性疾患の機序といった文脈で研究されています。

SOCS-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSOCS5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SOCS5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SOCS5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SOCS-5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SOCS-5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SOCS5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SOCS-5の機能に不可欠なSOCS5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SOCS5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SOCS-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSOCS-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SOCS5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SOCS-5 HDRプラスミド（h）および SOCS-5 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSOCS5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSOCS5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。