Snapin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406317

Visão geral

SNAPIN codifica a Snapin, uma pequena proteína citosólica que se associa à maquinaria SNARE e a complexos de ancoragem para apoiar o acoplamento de vesículas e a exocitose regulada, particularmente em neurônios e células neuroendócrinas. A Snapin tem sido relacionada ao preparo (priming) de vesículas sinápticas, à liberação de neurotransmissores acoplada ao cálcio e ao tráfego relacionado a endossomos/lisossomos por meio de interações que coordenam eventos de fusão de membranas. Ao influenciar a transmissão sináptica e o transporte intracelular, o SNAPIN é frequentemente estudado em vias relevantes para a conectividade neuronal, a função de autofagia-lisossomo e a sinalização responsiva ao estresse. Alterações no tráfego dependente de Snapin têm sido investigadas no contexto de mecanismos de doenças do neurodesenvolvimento e neurodegenerativas, nas quais o transporte vesicular e a proteostase estão comprometidos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Snapin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SNAPIN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SNAPIN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SNAPIN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Snapin.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SNAPIN para a investigação da sinalização de Snapin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SNAPIN críticos para a função Snapin
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SNAPIN para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Snapin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Snapin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SNAPIN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Snapin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Snapin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SNAPIN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SNAPIN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.